單克隆抗體製備流程:單克隆抗體技術流程[朗讀]

(1)細胞培養技術和細胞融合技術是單克隆抗體技術的基礎.(2)圖中培養基屬於選擇培養基,用來篩選雜交瘤細胞.(3)單克隆抗體與常規的血清抗體相比,其最大的優越。

過程1)免疫脾細胞的製備製備單克隆抗體的動物多採用純系balb/c小鼠.免疫的方法取決於所用抗原的性質.免疫方法同一般血清的製備,也可採用脾內直接免疫法。

將純化過的抗原注射進小鼠等試驗動物血液,產生免疫後提取其漿細胞和骨髓瘤細胞融合,培養、稀釋、再分開培養直到製得單細胞群後提取分泌產物能和抗原結合的,保留培養物大量繁殖,培養液中即可提取大量單克隆抗體.特點:靈敏度高,專一性強,主要用於診斷、檢定,也可用於治療。

1.對小鼠注射特定的抗原蛋白,使小鼠產生免疫反應;2.得到相應的b淋巴細胞;3.將小鼠骨髓瘤細胞與b淋巴細胞融合,再用特定的選擇培養基進行篩選;4.在該培養基上,未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡,只有融合的雜種細胞才能生長(這種雜種細胞的特點是既能迅速大量繁殖又能產生專一的抗體);5.對上述雜交瘤細胞還需進行克隆化培養和抗體檢測,經多次篩選,就可獲得足量的能分泌所需抗體的細胞;6.最後,將雜交瘤細胞在體外條件下做大規模培養,或注射到小鼠腹腔內增殖,這樣,從細胞培養液或小鼠腹水中,就可以提取出大量的單克隆抗體了。

(1)動物細胞培養(微生物培養)(2)選擇(3)特異性強,靈敏度高(4)滅活的病毒(5)在體外大量增殖分泌特異性抗體(6)骨髓造血干(7)主動運輸(主動吸收)。