原核表達條件:原核表達實驗步驟[朗讀]

啟動子16srrna結合位點即sd序列外源基因終止子若要得到有意義產物,外源基因不能含內含子。

真核細胞和原核細胞的dna有編碼區和非編碼區組成.但是真核細胞的dna中的編碼區中又有內含子和外顯子.外顯子是可以轉錄翻譯的.內含子是控制轉錄翻譯的.而原核細胞卻沒有內含子和外顯子.它的編碼區是連續的.所以它只能表達連續的編碼區,不能表達真核細胞那不連續的編碼區.所以真核細胞的dna要在原核中表達,就只要外顯子就夠了.就要把內含子去掉。

影響外源基因高效表達的各種因素:一、外源基因的表達效率①啟動子的強弱.有效的轉錄起始是外源基因能否在宿主細胞中高效表達的關鍵步驟之一,也可以說,轉錄起始的速率是基因表達的主要限速步驟。

菌濃度od=0.6-1.0開始誘導,你可以在2h,4h,8h的時候取個樣,跑一個page膠考馬斯染色看看總的目的蛋白濃度,每個蛋白表達速度不同,需要的時間不一樣,一般4h就。

你好!原核表達體系的優點:培養方法簡單.迅速.經濟.適合大規模生產工藝原核表達體系的缺點是:(1)缺乏合適的轉錄後加工機制,因此不宜表達真核生物基因組基因;(2)缺乏合適的翻譯後加工機制,因此表達產物不能適當摺疊和修飾;(3)很難在大腸桿菌表達體系中表達大量的可溶性蛋白.真核表達體系的有點:(1)既能表達cdna,也能表達真核基因組dna;(2)表達產物適當修飾並區域化分布.缺點是:操作技術難.費時.不經濟.打字不易,採納哦。